小鼠胱天蛋白酶11elisa試劑盒操作流程

小鼠胱天蛋白酶11elisa試劑盒操作流程：

1待測樣品孔中每孔加入待測樣品100μl，每種樣品設3個平行孔；設兩個陰性對照孔，每孔加未處理組的細胞裂解液100μl；另設一個空白對照孔，加入純細胞裂解液100μl。

2酶標板置4℃，包被過夜。

3洗板：吸干孔內反應液，用洗滌液過洗一遍將洗滌液注滿板孔后，即甩去，之后將洗滌液注滿板孔，浸泡1-2分鐘，間歇搖動。甩去孔內液體后在吸水紙上拍干。重復洗滌3-4次。

4陰性對照孔每孔加入PBS 50μl，樣品孔及空白孔每孔加入1:500稀釋的兔抗人AIF抗體工作液50μl。

5酶標板置37℃培養(yǎng)箱的濕盒內，孵育60min。

6洗板，同4。

7每孔加1:5000稀釋的HRP-標記的山羊抗兔抗體工作液 100μl。

8酶標板置37℃培養(yǎng)箱的濕盒內，孵育60min。

9洗板，同4。

10每孔加TMB顯色液 100μl，輕輕混勻10s，置37℃暗處反應15-20min。

11每孔加100μl 2mol/L H2SO4終止反應。