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小鼠連接素elisa試劑盒樣本實驗前準(zhǔn)備步驟

發(fā)表時間:2020-04-09 13:42

  小鼠連接素elisa試劑盒樣本實驗前準(zhǔn)備步驟:


  ELISA試劑盒液體樣本:包括血清、血漿、尿液、胸腹水、腦脊液、細(xì)胞培養(yǎng)上清等。


  一、血清


  室溫血液自然凝固10-20分鐘后,離心20分鐘左右2000-3000轉(zhuǎn)/分。仔細(xì)收集上清。保存過程中如有沉淀形成,應(yīng)再次離心。


  二、血漿


  應(yīng)根據(jù)標(biāo)本的要求選擇EDTA、檸檬酸鈉或肝素作為抗凝劑,混合10-20分鐘后,離心20分鐘左右2000-3000轉(zhuǎn)/分。仔細(xì)收集上清。保存過程中如有沉淀形成,應(yīng)再次離心。


  三、尿液


  用無菌管收集。離心20分鐘左右2000-3000轉(zhuǎn)/分。仔細(xì)收集上清。保存過程中如有沉淀形成,應(yīng)再次離心。胸腹水、腦脊液參照此實行。


  四、細(xì)胞培養(yǎng)上清


  檢測分泌性的成份時,用無菌管收集。離心20分鐘左右2000-3000轉(zhuǎn)/分。仔細(xì)收集上清。


  五、培養(yǎng)細(xì)胞


  檢測細(xì)胞內(nèi)的成份時,用PBSPH7.2-7.4稀釋細(xì)胞懸液,細(xì)胞濃度達(dá)到100萬/ml左右。通過反復(fù)凍融或加入組織蛋白萃取試劑,以使細(xì)胞破壞并放出細(xì)胞內(nèi)成份。離心20分鐘左右2000-3000轉(zhuǎn)/分。仔細(xì)收集上清。保存過程中如有沉淀形成,應(yīng)再次離心。


  六、組織標(biāo)本


  切割標(biāo)本后,稱取重量。加入一定量的PBS,PH7.4。用液氮迅速冷凍保存?zhèn)溆谩?biāo)本融化后仍然保持2-8℃的溫度。加入一定量的PBSPH7.4,或組織蛋白萃取試劑, 用手工或勻漿器將標(biāo)本勻漿化。離心20分鐘左右2000-3000轉(zhuǎn)/分。仔細(xì)收集上清。分裝后一份待檢測,其余冷凍備用。


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