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小鼠內(nèi)毒素(ET)ELISA試劑盒操作方法

發(fā)表時間:2020-06-02 13:49

  實驗是檢驗真理的標準,但是前提是要步驟方法正確,一旦實驗過程中產(chǎn)生錯誤,數(shù)據(jù)就會產(chǎn)生偏差,所以我們要慎之又慎和了解清楚它的操作方法,下面給大家講解一下小鼠內(nèi)毒素(ET)ELISA試劑盒操作方法。


  一、使用前,將所有試劑充分混勻。不要使液體產(chǎn)生大量的泡沫,以免加樣時加入大量的氣泡,產(chǎn)生加樣上的誤差。


  二、根據(jù)待測樣品數(shù)量加上標準品的數(shù)量決定所需的板條數(shù)。每個標準品和空白孔建議做復孔。每個樣品根據(jù)自己的數(shù)量來定,能使用復孔的盡量做復孔。標本用標本稀釋液1:1稀釋后加入50ul于反應孔內(nèi)。


  三、加入稀釋好后的標準品50ul于反應孔、加入待測樣品50ul于反應孔內(nèi)。立即加入50ul的生物素標記的抗體。蓋上膜板,輕輕振蕩混勻,37℃溫育1小時。


  四、甩去孔內(nèi)液體,每孔加滿洗滌液,振蕩30秒,甩去洗滌液,用吸水紙拍干。重復此操作3次。如果用洗板機洗滌,洗滌次數(shù)增加一次。


  五、每孔加入80ul的親和鏈酶素-HRP,輕輕振蕩混勻,37℃溫育30分鐘。


  六、重復步驟四操作。


  七、每孔加入底物A、B各50ul,輕輕振蕩混勻,37℃溫育10分鐘。避免光照。


  八、取出酶標板,迅速加入50ul終止液,加入終止液后應立即測定結(jié)果。


  九、在450nm波長處測定各孔的OD值。(內(nèi)容僅供參考,如有問題或遇到問題請來電咨詢,我們會竭誠為您服務)


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