大鼠血管/內皮成纖維抑制劑細胞培養操作規程

大鼠血管/內皮成纖維抑制劑細胞培養操作規程：

一．培養基及培養凍存條件準備：

1）準備RPMI-1640培養基(RPMI-1640：GIBCO，貨號21875-091)，90%；優質胎牛血清，10%。

2）培養條件： 氣相：空氣，95%；二氧化碳，5%。 溫度：37℃，培養箱濕度為70%-80%。

3）凍存液：90%血清，10%DMSO，現用現配，液氮儲存。

二．細胞處理：

1）復蘇細胞：將含有1mL細胞懸液的凍存管迅速放入37℃水浴中（水面要低于凍存管蓋部）搖晃解凍，移入事先準備好的含有4mL培養基的15ml離心管中混合均勻。在1000RPM條件下離心4分鐘，棄去上清液，加入1mL培養基后吹勻。然后將所有細胞懸液移入含有5ml培養基的培養瓶中培養過夜。第二天換液并檢查細胞密度。

2）細胞傳代：如果細胞密度達80%-90%，即可進行傳代培養。

對于懸浮細胞，傳代可參考以下方法：

方法一：收集細胞，1000RPM，常溫條件下離心5分鐘，棄去上清液，補加1-2mL培養液后吹勻，將細胞懸液按1：2到1：5的比例分到新的含8ml培養基的新皿中或者瓶中。

方法二：可選擇半數換液方式，棄去半數培養基后，將剩余細胞懸起，將細胞懸液按1：2到1：3的比例分到新的含8ml培養基的新皿中或者瓶中。

3）細胞凍存：待細胞生長狀態良好時，可進行細胞凍存。懸浮細胞凍存時，應將細胞收集，1000RPM，常溫條件下離心5分鐘，少量保存上清液（防止細胞吸走），加入部分新鮮培養基，吹打均勻后，加入到凍存管中，在凍存管中加入10%DMSO搖勻后進行凍存。

磷酸化DNA依賴性蛋白激酶抗體大鼠胱天蛋白酶9(Casp-9)ELISA Kit

磷酸化DNA依賴性蛋白激酶抗體大鼠胱天蛋白酶8(Casp-8)ELISA Kit

蓬亂蛋白2抗體大鼠胱天蛋白酶7(CASP7)ELISA Kit

防御素α5抗體大鼠胱硫醚-γ-裂解酶(CSE)ELISA Kit

鋅離子結合蛋白DTX2抗體大鼠胱硫醚β-合酶(CBS)ELISA Kit

EYA3蛋白抗體大鼠瓜氨酸ELISA Kit

刺痛感蛋白抗體大鼠固醇調節元件結合蛋白1C(SREBP-1C)ELISA Kit

翻譯延伸因子EF-1 α2抗體大鼠固醇調節元件結合蛋白1A(SREBP-1A)ELISA Kit

延伸因子EF-1δ抗體大鼠骨織素(Ostn)ELISA Kit

延伸因子EF-1 γ抗體大鼠骨形態形成蛋白拮抗蛋白ELISA Kit

磷酸化真核翻譯延長因子2抗體大鼠骨特性堿性磷酸酶C端肽ELISA Kit

磷酸化真核延伸因子激酶2抗體大鼠骨鈣素(OT)ELISA Kit

纖連蛋白4抗體大鼠骨成型蛋白3(BMP-3)ELISA Kit

延伸因子結合蛋白EFTUD2抗體大鼠谷胱甘肽還原酶(GR)ELISA Kit

表皮生長因子樣蛋白6抗體大鼠谷胱甘肽過氧化物酶(GSH-PX)ELISA Kit

磷酸酶/磷酸二酯酶家族成員6抗體大鼠谷胱甘肽S轉移酶θ1(GSTT1)ELISA Kit

核苷轉運蛋白ENT1抗體大鼠谷胱甘肽S轉移酶P(GSTP1)ELISA Kit

核苷轉運蛋白ENT2抗體大鼠谷胱甘肽S轉移酶Mu1(GSTM1)ELISA Kit

鳥嘌呤核苷酸交換因子4大鼠谷胱甘肽S轉移酶(GSTs)ELISA Kit