NAD激酶（NADK）生化試劑盒（可見分光光度法）操作步驟

NAD激酶（NADK）生化試劑盒（可見分光光度法）操作步驟:

實驗開始前，各試劑均應平衡至室溫（試劑不能直接在37℃溶解）；試劑或樣品稀釋時，均需混勻，混勻時盡量避免起泡。實驗前應預測樣品含量，如樣品濃度過高時，應對樣品進行稀釋，以使稀釋后的樣品符合試劑盒的檢測范圍，計算時再乘以相應的稀釋倍數(shù)。

1.        加樣：分別設空白孔、標準孔、待測樣品孔。空白孔加樣品稀釋液100μl，余孔分別加標準品或待測樣品100μl，注意不要有氣泡，加樣將樣品加于酶標板孔底部，盡量不觸及孔壁，輕輕晃動混勻，酶標板加上蓋或覆膜，37℃反應120分鐘。為保證實驗結果有效性，每次實驗請使用新的標準品溶液。

2.        棄去液體，甩干，不用洗滌。每孔加檢測溶液A工作液 100μl（在使用前一小時內配制），酶標板加上覆膜, 37℃反應60分鐘。

3.        溫育60分鐘后，棄去孔內液體，甩干，洗板3次，每次浸泡1-2分鐘，大約400μl/每孔，甩干（也可輕拍將孔內液體拍干）。

4.        每孔加檢測溶液B工作液（同檢測A工作液） 100μl，酶標板加上覆膜37℃反應60分鐘。

5.        溫育60分鐘后，棄去孔內液體，甩干，洗板5次，每次浸泡1-2分鐘，350μl/每孔，甩干（也可輕拍將孔內液體拍干）。

6.        依序每孔加底物溶液90μl，酶標板加上覆膜37℃避光顯色（30分鐘內，此時肉眼可見標準品的前3-4孔有明顯的梯度蘭色，后3-4孔梯度不明顯，即可終止）。

7.       依序每孔加終止溶液50μl，終止反應，此時藍色立轉黃色。終止液的加入順序應盡量與底物液的加入順序相同。為了保證實驗結果的準確性，底物反應時間到后應盡快加入終止液。

乳酸片球菌

戊糖片球菌

朝鮮芽孢八疊球菌

宋氏志賀氏菌

木醋桿菌

明亮發(fā)光桿菌

空腸彎曲桿菌

嗜酸乳桿菌

干酪乳桿菌

  耐鹽芽孢桿菌

無乳鏈球菌

德氏乳桿菌乳酸亞種（萊氏曼氏乳桿菌）

斯氏李斯特氏菌

側孢短芽孢桿菌

乳酸乳球菌乳亞種

牙齦卟啉單胞菌

菩提奇異球菌

干燥棒桿菌

屎腸球菌(屎鏈球菌)

具核梭桿菌多形亞種

脆弱擬桿菌

齒雙歧桿菌

粘性放線菌

植物乳桿菌植物亞種

遲緩愛德華氏菌

哈氏弧菌