支原體清除劑的一般使用

支原體去除劑在細胞培養中的應用雖能有效清除污染，但其對細胞本身的影響仍需謹慎評估。實驗數據顯示，部分抗生素類去除劑會干擾細胞代謝周期——例如濃度超過5μg/mL的喹諾酮類藥物可使HEK293細胞的增殖速率降低37%，這種抑制作用往往在停藥后仍持續2-3代。更值得關注的是，某些含表面活性劑的化學清除劑會導致細胞膜表面蛋白的暫時性脫落，流式細胞術檢測發現CD44和整合素β1的表達量在處理后24小時內下降約40%。

支原體(mycoplasma)，又稱霉形體，為目前發現的最小的最簡單的原核生

支原體清除試劑(Mycoplasma Removal Agent，MRA)是一種用于抑制和清除在培養細胞過程中廣泛存在的支原體污染的試劑，亦可稱為支原體去除劑。MRA既可以用于去除細胞中已有的支原體污染，也可以用于防止支原體污染。MRA的具體工作濃度因支原體的種類不同而有所不同，在實際清除或防止支原體污染時，可使用試劑供應商推薦的工作濃度，也可以自行測試獲取適當的工作濃度。在實驗前，應根據不同的實驗要求、細胞類型等進行優化，確定**條件。

支原體清除劑的一般使用方法：

1、將推薦濃度的支原體清除劑添加到被支原體污染的細胞培養物中，并至少培養1周；

2、若推薦濃度對去除支原體無效，可嘗試提高工作濃度；

3、對于培養基更換或培養物轉移(傳代)，使用含有相同濃度支原體清除劑的培養基；

4、在不使用支原體清除劑的情況下轉移細胞培養物數次，并確認污染支原體沒有再生。

為平衡清除效率與細胞活性，建議采用梯度處理策略。首日使用治療濃度（如2μg/mL普那霉素）沖擊處理6小時，后續3天改用0.5μg/mL維持濃度。這種方案在保持85%以上清除率的同時，能將細胞凋亡率控制在15%以內。值得注意的是，原代細胞對去除劑更為敏感，在處理人間充質干細胞時，建議將暴露時間縮短至常規細胞系的1/3。